المحتوى

• الفرق الرئيسي
• النشاف الجنوبي ضد. النشاف الغربي
• رسم بياني للمقارنة
• ما هو النشاف الجنوبي?
• ما هو النشاف الغربي?
• الاختلافات الرئيسية
• خاتمة

الفرق الرئيسي

الفرق الرئيسي بين Southern Blotting و Western Blotting هو أن Southern Blotting هي تقنية يتم استخدامها للكشف عن جزء معين من الحمض النووي في عينة معينة بينما يتم استخدام Western Blotting لاكتشاف بروتين محدد في عينة معينة.

النشاف الجنوبي ضد. النشاف الغربي

النشاف هو تقنية يستخدمها العلماء لفصل أنواع مختلفة من الجزيئات من مزيج أو عينة. في هذه التقنية ، تتحرك الجزيئات الكبيرة مثل الأحماض النووية (DNA و RNA) والبروتينات في خليط عبر لوح من الجل. هنا ، سوف تتحرك جزيئات الدقائق بشكل أسرع من الجزيئات الكبيرة. يتم ضغط هذه الجزيئات على سطح الغشاء المانع الذي ينقل الجزيئات إلى الغشاء. هناك أنواع مختلفة من النشاف على أساس الكشف عن مواد معينة ، مثل النشاف الجنوبي والنشاف الشمالي والنشاف الغربي. النشاف الجنوبي هو نوع النشاف المستخدم للكشف عن الحمض النووي بينما يستخدم النشاف الغربي لاكتشاف البروتين. تم تطوير النشاف الجنوبي من قبل إدوارد م. الجنوبي في عام 1975. لذلك ، يعرف باسم النشاف الجنوبي. من ناحية أخرى ، تم تطوير النشاف الغربي من قبل مجموعة جورج ستارك في جامعة ستانفورد في عام 1979. تم استخدام هذا الاسم لتتناسب مع النشاف الجنوبي. يتم استخدام النشاف الجنوبي لاكتشاف تسلسل الحمض النووي المحدد ، بينما يتم استخدام النشاف الغربي لاكتشاف تسلسل حمض أميني معين أو بروتين معين.

رسم بياني للمقارنة

النشاف الجنوبي	النشاف الغربي
تُعرف التقنية المستخدمة في اكتشاف تسلسل DNA معين في خليط معيّن باسم النشاف الجنوبي.	تُعرف التقنية المستخدمة في اكتشاف تسلسل الأحماض الأمينية المحددة للبروتين في خليط معين باسم النشاف الجنوبي.
طورت بواسطة
تم تطوير النشاف الجنوبي من قبل إدوارد م. الجنوبي في عام 1975.	تم تطوير النشاف الغربي من قبل مجموعة جورج ستارك في جامعة ستانفورد في عام 1979.
نوع الاكتشاف
يستخدم النشاف الجنوبي لاكتشاف تسلسل الحمض النووي المحدد.	يستخدم النشاف الغربي لاكتشاف تسلسل حمض أميني معين أو بروتين.
المبدأ
وهي تعمل على مبدأ التهجين.	إنه يعمل على مبدأ طريقة الكشف المناعي أو تفاعل الجسم المضاد.
مسبار
يتم استخدام الحمض النووي المفرد الذين تقطعت بهم السبل أو الحمض النووي الريبي في بعض الأحيان بمثابة مسبار.	تستخدم الأجسام المضادة الأولية والثانوية كمسبر.
هلام الكهربائي
يستخدم Agarose gel الكهربائي في النشاف الجنوبي.	يستخدم SDS PAGE / Polyacrylamide gel لفصل البروتينات في النشاف الغربي
إجراءات النشاف
النشاف الجنوبي يتبع عملية نقل الشعيرات الدموية.	النشاف الغربي يتبع إجراء النقل الكهربائي.
عينة
خلال النشاف الجنوبي ، يجب تغيير طبيعة العينة.	أثناء النشاف الغربي ، يجب أن تكون العينة في حالتها الأصلية.
حجب
لا يوجد أي خطوة مثل حظر وتشارك في النشاف الجنوبي.	أثناء النشاف الغربي ، يتم حظر مواقع الأجسام المضادة غير المحددة على ورق النيتروسليلوز بمساعدة مسحوق الحليب أو ألبومين مصل الأبقار (BSA).
طرق وضع العلامات
طرق وضع العلامات الشائعة التي تستخدم في النشاف الجنوبي هي استخدام الأصباغ chromogenic أو التسمم الإشعاعي أو العلامات الفلورية الخ.	طرق وضع العلامات المستخدمة في النشاف الغربي هي استخدام الجسم المضاد ذي العلامات الفلورية أو التسمم الإشعاعي أو الأصباغ chromogenic أو تشكيل diaminobenzidine ، إلخ.
طرق الكشف
يتم استخدام الكشف عن الضوء ، Autoradiograph ، والتغيرات في اللون كطرق للكشف في النشاف الجنوبي.	طرق الكشف في النشاف الغربي هي تغييرات في اللون واكتشاف الضوء وما إلى ذلك.
تطبيق
يستخدم النشاف الجنوبي في الكشف عن الحمض النووي ، واختبار الأبوة ، وإصبع الحمض النووي ، لتحديد هوية الضحية ، وتحديد المجرمين ، والعثور على العوامل المعدية وتحديد الطفرة أو إعادة ترتيب الجينات ، إلخ.	يستخدم النشاف الغربي للعثور على عدد البروتين في المزيج ، لاكتشاف وجود فيروس نقص المناعة البشرية ، والفيروسات ، والبكتيريا ، إلخ في المصل ، لاكتشاف البروتينات التالفة واستخدامها كإجراء محدد للهربس والتهاب الكبد B والليمون. المرض ، ومرض كروتزفيلد جاكوب ، إلخ.

ما هو النشاف الجنوبي?

النشاف الجنوبي هو أقدم طريقة النشاف التي قدمها إدوين ساذرن ، والتي سميت باسم النشاف الجنوبي. يتم استخدامه لمعرفة تسلسل محدد من الحمض النووي في عينة أو مزيج معين. الخطوات التي تنطوي عليها خلال النشاف الجنوبي هي الكهربائي ، ونقل ، والكشف عن تسلسل معين. بادئ ذي بدء ، يتم تجزئة الحمض النووي بمساعدة إنزيم تقييد محدد. ثم يتم فصل شظايا الحمض النووي المطلوب من خلال رحلان كهربائي. يتم تغيير طبيعة هذه الشظايا بمساعدة محلول قلوي ، على سبيل المثال ، NaOH ، إلخ لفصل خيوط الحمض النووي. ثم يتم نقل شظايا الحمض النووي المفرد التي تقطعت بهم السبل على غشاء خلال عملية النشاف. ثم يتم التعامل مع هذا الحمض النووي الغشاء المحدد مع التحقيق المسمى. سيرتبط هذا المجس بحبلا تكميليًا على الحمض النووي للأغشية والذي يمكن رؤيته بواسطة مخطط الإشعاع الذاتي وما إلى ذلك.

ما هو النشاف الغربي?

اخترعت طريقة جورج النشاف من قبل مجموعة جورج ستارك في جامعة ستانفورد والتي تستخدم لتحديد تسلسل محدد من الأحماض الأمينية في البروتين. ومن المعروف أيضا باسم لطخة البروتين أو النشاف المناعي. الخطوات أثناء التنفيس الغربي هي الرحلان الكهربي ، ونقل ، واكتشاف بروتينات معينة. بادئ ذي بدء ، تجانس الخليط. ثم فصل جزيء الاهتمام بمساعدة الكهربائي. نقل هذه الجزيئات على الغشاء وتحديد البروتين المحدد باستخدام مسبار معين.

الاختلافات الرئيسية

1. تُعرف التقنية المستخدمة في اكتشاف تسلسل DNA معين في خليط معيّن باسم النشاف الجنوبي ، بينما تُعرف التقنية المستخدمة في اكتشاف تسلسل الأحماض الأمينية المحددة للبروتين في خليط معيّن باسم النشاف الجنوبي.
2. تم تطوير النشاف الجنوبي من قبل إدوارد م. الجنوبي في عام 1975 ، والمعروف باسم النشاف الجنوبي. من ناحية أخرى ، تم تطوير النشاف الغربي من قبل مجموعة جورج ستارك في جامعة ستانفورد في عام 1979.
3. يستخدم النشاف الجنوبي لاكتشاف تسلسل الحمض النووي المحدد. على العكس ، يتم استخدام النشاف الغربي لاكتشاف تسلسل حمض أميني معين أو بروتين.
4. النشاف الجنوبي يعمل على مبدأ التهجين على الجانب الآخر. النشاف الغربي يعمل على مبدأ طريقة الكشف المناعي أو تفاعل الجسم المضاد.
5. يتم استخدام الحمض النووي المفرد الذين تقطعت بهم السبل أو في بعض الأحيان الحمض النووي الريبي كمسبر في النشاف الجنوبي على الجانب الآخر ، في الأجسام المضادة الأولية والثانوية النشاف الغربية تستخدم كمسبار.
6. يستخدم Agarose gel الكهربائي في النشاف الجنوبي بينما يستخدم SDS PAGE / Polyacrylamide gel لفصل البروتينات في النشاف الغربي.
7. النشاف الجنوبي يتبع عملية نقل الشعيرات الدموية ، من ناحية أخرى ؛ النشاف الغربي يتبع إجراء النقل الكهربائي.
8. أثناء النشاف الجنوبي ، يجب تغيير طبيعة العينة ، في حين يجب أن تكون العينة في حالتها الأصلية أثناء النشاف الغربي.
9. لا يوجد أي خطوة مثل الحجب متورطة في النشاف الجنوبي على الجانب الآخر ، خلال النشاف الغربي ، يتم حظر مواقع الأجسام المضادة غير المحددة على ورق النيتروسليلوز بمساعدة مسحوق الحليب أو ألبومين المصل البقري (BSA).
10. تتمثل طرق الوسم الشائعة المستخدمة في النشاف الجنوبي في استخدام الأصباغ chromogenic أو التوسيم الإشعاعي أو الوسم الفلوريسنت ، إلخ. بينما طرق التوسيم المستخدمة في النشاف الغربي هي استخدام الجسم المضاد الفلوريسينتيلي أو التسمم الإشعاعي أو الأصباغ chromogenic أو تشكيل diaminobenzidine ، إلخ.
11. يتم استخدام الكشف عن الضوء ، Autoradiograph ، والتغيرات في اللون كطرق للكشف في النشاف الجنوبي ، في حين أن طرق الكشف في النشاف الغربي هي تغييرات في اللون واكتشاف الضوء ، إلخ.
12. يستخدم النشاف الجنوبي في الكشف عن الحمض النووي ، واختبار الأبوة ، وإصبع الحمض النووي ، لتحديد هوية الضحية ، وتحديد المجرمين ، والعثور على العوامل المعدية وتحديد طفرة أو إعادة ترتيب الجينات ، وما إلى ذلك. على العكس من ذلك ، يتم استخدام النشاف الغربي للعثور على عدد البروتين في خليط ، للكشف عن وجود فيروس نقص المناعة البشرية ، والفيروسات ، والبكتيريا ، وما إلى ذلك في المصل ، لاكتشاف البروتينات التالفة واستخدامها كإجراء محدد لعلاج الهربس والتهاب الكبد B ومرض لايم ومرض كروتزفيلد جاكوب ، إلخ.

خاتمة

يلخص النقاش أعلاه أن النشاف الجنوبي هو أقدم تقنية النشاف المستخدمة في اكتشاف شريحة معينة من الحمض النووي في عينة بينما تم اكتشاف النشاف الغربي في الآونة الأخيرة واستخدم لتحديد تسلسل محدد من الأحماض الأمينية أو بروتين معين.